Анализ на кальретикулиновую мутацию — CALR

Анализ на кальретикулиновую мутацию (CALR) — это лабораторное исследование для диагностики миелопролиферативных заболеваниях крови — эссенциальной тромбоцитемии, идиопатического миелофиброза и рефрактерной анемии с кольцевыми сидеробластами.

Синонимы: calreticulin mutation.

CALR-мутация — это

соматическая мутация в гене кальретикулина на коротком плече 19-й хромосомы. Ген состоит из 9-ти экзонов, а все описанные 36 мутаций расположены в области 9-го экзона. Кальретикулиновая мутация ведет к изменениям в стволовой кроветворной клетке и нарушению процесса образования и созревания клеток крови (гранулоцитарного ряда).

80% мутаций гена кальретикулина представлены двумя типами:

• тип 1 — делеция (52-bp deletion; 1092_1143del) — 53%, чаще при первичном миелофиброзе
• тип 2 — вставка (инзерция, 5-bp insertion; 1154_1155insTTGTC) — 32%

Мутацию гена кальретикулина исследуют всегда при отрицательном результате тестирования на JAK2-мутацию и подозрении на миелопролиферативное заболевание.

CALR-мутация положительна в 70% случаев JAK2-отрицательных эссенциальных тромбоцитемий и у 60-80% больных с JAK2-негативных идиопатическим миелофиброзом.

Что такое CALR?

Кальретикулин или CALR — это белок эндоплазматического ретикулума, цитоплазмы и клеточной мембраны. Принимает участие в регуляции сигнальной функции, связывает ионы кальция. Мутация гена кальретикулина ведет к избыточной активации JAK-STAT пути.

Миелопролиферативные заболевания

Миелопролиферативные заболевания — группа заболеваний костного мозга, объединенных в вместе по признаку первичной мутации на уровне стволовой клетки крови. Характеризуется не контролируемым делением и созреванием одной или нескольких клеточных линий крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты) и постепенным угнетением нормального кроветворения.

Слово «миелопролиферативный» значит, что костный мозг (на греческом миелос) пролиферирует, вырабатывает в избыточном количестве клетки крови. Нарушение находится на уровне плюрипотентной стволовой клетки (плюрипотентный — способный развиваться в любую сторону — как в лейкоциты, так и эритроциты или тромбоциты).

Например, при тромбоцитемии — повышаются тромбоциты, первичном миелофиброзе — также тромбоциты, а при хроническом миелолейкозе — лейкоциты (гранулоциты).

Частота миеопролиферативных заболеваний довольно большая, ежегодно заболевают 6-9 человек из 100 тысяч. Чаще болеют люди старшего возраста, после 50-ти лет.

Симптомы

• общая слабость
• снижение веса и отсутствие аппетита
• повышенная потливость, особенно в ночные часы
• тяжесть в правом/левом подреберье (увеличение селезенки/печени)

Особенности эссенциальной тромбоцитемии и первичного миелофиброза у CALR-положительных пациентов:

• преимущественно мужчины
• более молодой возраст
• низкий уровень лейкоцитов и гемоглобина, гематокрита
• более высокий показатель тромбоцитов
• ниже риск тромбоза
• лучше прогноз
• поддаются терапии ингибиторами Янусовой киназы (JAK)

Показания

• повышенное/сниженное число тромбоцитов в крови (когда исключены причины вторичного тромбоцитоза)
• анемия — снижение уровня гемоглобина и/или эритроцитов в крови неясного происхождения
• повышенное/сниженное количество лейкоцитов в крови

Методы исследования

• метод Сэнгера (метод обрыва цепи)
• полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Материал для анализа

• венозная кровь, взятая в пробирку с ЭДТА
• фиксированная ткань костного мозга, полученная при трепанобиопсии или стернальной пункции

Норма

• CALR-мутация не обнаружена

Дополнительные анализы

• общий анализ крови — эритроциты, эритроцитарные индексы, гемоглобин,  гематокрит, лейкоциты и лейкоцитарная формула, тромбоциты
• микроскопия мазка крови
• витамин В12, фолиевая кислота
• эритропоэтин
• биохимический анализ крови
• СОЭ — скорость оседания эритроцитов
• электрофорез белков крови
• онкомаркеры
• BCR/ABL мутация
• JAK2-мутация
• MPL-мутация
• стернальная пункция
• трепанобиопсия

Расшифровка результата

• CALR-мутация выявлена (в гетерозиготной, гомозиготной форме) — наличие мутации подтверждает диагноз миелопролиферативного заболевания
• CALR-мутация не выявлена

Отрицательный результат исследования на CALR-мутацию не исключает диагноз миелопролиферативного заболевания, но делает его менее вероятным.