Подсчет количества эритроцитов в счетной камере

Метод

Кровь предварительно разводят с целью уменьшения числа клеток, подлежащих счету. В химические пробирки отмеривают пипеткой по 4 миллилитра 3%-ного раствора хлорида натрия и осторожно выдувают в нее 0,02 миллилитра капиллярной крови (кровь забирают пипеткой от гемометра Сали). Полученное разведение можно практически принять равным 1:200. Взвесь тщательно перемешивают и затем заполняют камеру с сетками Горяева.

Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15 х 15). Большие квадраты, расчерченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов, чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или горизонтальными линиями, и с квадратами чистыми, без линий. Глубина камеры равна 1/10 миллиметра, сторона малого квадрата — 1/20 миллиметра; объем малого квадрата равен 14 000 миллиметров кубических.

Перед заполнением камеру и шлифованное покровное стекло моют и сушат. Покровное стекло притирают к камере так, чтобы появились радужные кольца. Каплю разведенной крови вносят пипеткой под притертое покровное стекло камеры. После заполнения камеру оставляют на 1—2 минуты в покое для оседания форменных элементов, затем приступают к подсчету при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения (прикрытой диафрагме и опущенном конденсоре).

Эритроциты считают в 5 больших квадратах (5 х 16 = 80 малым квадратам), расположенных по диагонали. Для этого отыскивают левый верхний большой разграфленный квадрат, подсчитывают количество находившихся в нем эритроцитов, затем по диагонали вниз и направо находят следующий такой квадрат и так далее. Для того чтобы дважды не сосчитать одни и те же эритроциты, лежащие на пограничных линиях, соблюдают правило: к данному квадрату принадлежат те эритроциты, которые находятся большей своей частью внутри него, разделенные пограничной линией.

Считают только эритроциты на верхней и левой границе квадрата.

Рассчет

Количество эритроцитов в 1 миллилитре крови рассчитывают по формуле:

(а * 4000 * 200) /80

• а — число подсчитанных эритроцитов,
• 4000 — приведение к объему 1 мкл крови,
• 200 — степень разведе­ния,
• 80 — количество малых квадратов.

После сокращения, формула определения количества эритроцитов в крови выглядит следующим образом:

(а * 10 000) = млн/л

При взаимосокращении получается произведение — а * 10 000, то есть число подсчитанных эритроцитов в 5 больших квадратах на 10 000. Ошибка метода в среднем равна ±2,5 %.

Данный метод подсчета эритроцитов занимает довольно длительное время — как минимум 20-30 минут.

Наиболее часто снижение количества эритроцитов происходит при анемиях. Одновременно снижается количество гемоглобина. Повышение эритроцитов крови бывает довольно редко, при значительном обезвоживании и эритремии.