Важнейшие из методов определения концентрации гемоглобина — колориметрические. Они широко применяются на пратике ввиду их простоты и доступности.
Среди данных методов ранее широко применяли метод Сали.
Принцип
Определение уровня гемоглобина крови по гематиновому методу Сали основан на превращении гемоглобина при прибавлении к крови хлористоводородной кислоты в хлоргемин коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. Полученный раствор хлорида гематита разводят водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина.
Гемометр Сали
Определение уровня гемоглобина проводят в упрощенном колориметре — гемометре Сали. Этот прибор состоит из пластмассового штатива с 3 вертикальными гнездами. В боковых гнездах находятся 2 запаянные пробирки со стандартной жидкостью.
В среднее гнездо гемометра вставляют открытую сверху градуированную стеклянную пробирку того же диаметра, что и цветные стандарты. Градуированная пробирка имеет шкалу с делениями, показывающую количество гемоглобина в граммах на 100 миллилитров крови, то есть грамм-процентах (г%).
При геометре имеются специальная пипетка для воды и стеклянная палочка для перемешивания.
Методика
В градуированную пробирку наливают до деления, помеченного цифрой «2 грамм-процента» (нижняя круговая метка) 0,1 грамм-процента раствора хлористоводородной кислоты. Затем набирают кровь в капиллярную пипетку до метки «0,02 миллилитра», всасывая е ртом через резиновую трубку. Обтерев кончик пипетки снаружи ватой, опускают ее в пробирку с 0,1 грамм-процента раствором хлористоводородной кислоты и осторожно выдувают кровь.
Повторными всасываниями и выдуваниями верхнего слоя жидкости пипетку ополаскивают. Пробирку несколько раз встряхивают и, заметив время, ставят в штатив. Для полного превращения гемоглобина в хлорид гематита требуется не менее 5 минут. Через 5 минут геометр поднимают до уровня глаз и сравнивают цвет испытуемой жидкости с цветом стандартов. Обычно, за исключением случаев крайне тяжелой анемии, он темнее, чем в стандартных пробирках.
С помощью неградуированной пипетки к испытуемому раствору добавляют по каплям дистиллированную воду, перемешивают стеклянной палочкой и сравнивают со стандартами. Как только цвет исследуемой жидкости станет одинаков с цветом стандартов, отмечают, какому делению шкалы соответствует уровень жидкости (по нижнему мениску) в пробирке.
Промышленность выпускала гемометры, содержащие грамм-процентную шкалу. За идеальную норму была принята концентрация гемоглобина в крови 16,67 грамм-процента, или 166,7 грамма/литр.
При соблюдении всех правил работы с гемометром у одного и того же больного при определении гемоглобина в разных порциях крови получают расхождение результатов в пределах ±0,3 грамм-процента (3 грамма/литр).
Метод Сали для определения количества гемоглобина был прост и доступен, но субьективность оценки и длительность времени измерения усложняли его выполнение.
В норме уровень гемоглобина у женщин составляет 120-140 г/л, у мужчин количество гемоглобина больше и составляет 130-150 г/л.
(17 оценок, среднее: 4,35 из 5)
Загрузка...
